trialtusbioscience：CRISPR-Cas9 Protein  貨號：40-1320/40-1325

TriAltus Bioscience誕生于伯明翰阿拉巴馬大學(xué)的創(chuàng)新研究，是一家致力于將開創(chuàng)性的clm(CL7/Im7)純化技術(shù)商業(yè)化的衍生公司。Dmitry Vassylyev博士及其團(tuán)隊(duì)開發(fā)的這一專有系統(tǒng)重新定義了行業(yè)中酶純度和活性的標(biāo)準(zhǔn)。

TriAltus的高純度Cas9蛋白用于CRISPR技術(shù)的基因組編輯。重組化膿性鏈球菌Cas9 (wt)蛋白在大腸桿菌具有兩個(gè)(N-末端和C-末端)核定位信號(NLS)和CL7標(biāo)簽，其在純化過程中用切割前蛋白酶除去。Cas9蛋白與指導(dǎo)RNA (gRNA)結(jié)合，形成穩(wěn)定的核糖核蛋白(RNP)復(fù)合物，使細(xì)胞中的基因組編輯高效而精確。

規(guī)范

純潔| ~99% (SDS-PAGE凝膠分析)

酶源|化膿性鏈球菌Cas9表達(dá)于大腸桿菌用兩個(gè)(N-末端和C-末端)核定位信號(NLS)，并用我們的CL7標(biāo)簽技術(shù)純化。

內(nèi)毒素|<0.3 EU/ug by rFC method

儲存；儲備/運(yùn)輸專注度|5毫克/毫升

存儲緩沖|10 mM Tris-Cl pH 8.0，250 mM NaCl，50%甘油

推薦的儲存條件|-80攝氏度

過期|按照指示儲存時(shí)，自收到之日起6個(gè)月。避免重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。

圖一。與商業(yè)獲得的Cas9相比，CL7/Im7純化的Cas9的切割活性。在1.2%瓊脂糖/TAE凝膠上解析反應(yīng)，然后用SYBR GOLD染色。從商業(yè)來源(CO)獲得的Cas9或CL7/Im7純化的Cas9 (Im7)與等摩爾(+)，或無(-)，退火的sgRNA復(fù)合。將不同濃度的復(fù)合物與1.1 kb的目標(biāo)DNA片段在37℃下孵育15分鐘。sgRNA識別目標(biāo)DNA中間的序列，切割后產(chǎn)生約550 bp的片段。Im7純化的Cas9顯示出與商業(yè)Cas9相當(dāng)?shù)幕钚浴?/span>

圖二。CL7/Im7純化的Cas9和4步純化的Cas9在細(xì)胞中的活性相同。

(一)在用Lonza nucleofector 2b電穿孔和使用來自4步純化(頂行)或1步純化方案(底行)的Cas9WT改變RNP濃度后，人鐮狀細(xì)胞iPSCs(誘導(dǎo)多能干細(xì)胞)的相差顯微鏡檢查。

(二)中所示的電穿孔實(shí)驗(yàn)的存活率和修飾表(一)。用兩種方案純化的Cas9制備的RNP用一種sgRNA進(jìn)行測試，該sgRNA被設(shè)計(jì)用來糾正導(dǎo)致鐮狀細(xì)胞病的血紅蛋白中的1 BP錯(cuò)誤。通過數(shù)字PCR評估修飾率。這些蛋白質(zhì)產(chǎn)生了相同的生存力和修飾率，表明在細(xì)胞中具有同等的效率。這些測試是由UAB阿拉巴馬大學(xué)的蒂姆·湯斯和丁磊完成的。

SKU

100克:40-1320

500克:40-1325

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進(jìn)口貨物，最快交期1-2周。

4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質(zhì)量保證，所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式，為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源，加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè)，提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率，為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

7. 公司突出創(chuàng)新思維，提高工作效能，減低運(yùn)作成本，為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

trialtusbioscience：CRISPR-Cas9 Protein  貨號：40-1320/40-1325