半胱氨酰亞砜裂解酶（CSL)測(cè)試盒

微量法100T/48S

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

半胱氨酰亞砜裂解酶（CSL）廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥)，十字花科蕓薹屬

(如卷心菜，菜花，西蘭花)，以及豆科中的合金歡屬中，并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和半胱氨酸亞砜裂解酶的作用下轉(zhuǎn)化成香菇精，以及產(chǎn)生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內(nèi)源性甲醛生成的關(guān)鍵酶之一，測(cè)定CSL活性對(duì)于研究食品安全具有重要意義。

測(cè)定原理

CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亞砜反應(yīng)產(chǎn)生丙酮酸，與2,4-二硝*苯肼反應(yīng)，在堿性條件下顯棕紅色，在510nm下有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。

試劑組成和配制 

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×1瓶，4℃避光保存，臨用前加入2mL水溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃避光保存，臨用前加入10mL水溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存；

試劑三：液體15mL×1瓶，4℃保存。

試劑四：液體6mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑五：液體30mL×1瓶，4℃保存。

樣本處理

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿，4℃浸提40min。12000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。            

測(cè)定操作

計(jì)算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.7313x + 0.0027，R2 = 0.9993；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度：μmol/mL；y為吸光度△A

1. 按蛋白含量計(jì)算

C-S lyase活性（μmol/min/mg prot）=（△A -0.0027）÷ 0.7313×V樣÷(V樣×Cpr )÷T

                    =0.068×（△A-0.0027）÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

C-S lyase活性（μmol/min/g 鮮重）=（△A -0.0027）÷ 0.7313×V樣÷(V樣÷V樣總×W )÷T

                    =0.068×（△A-0.0027）÷ W

V樣，加入樣本上清體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T，反應(yīng)時(shí)間，20min。

注意事項(xiàng)

1. 若測(cè)定結(jié)果中吸光值超過(guò)1，請(qǐng)將樣本稀釋后進(jìn)行測(cè)定，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。香菇類樣本活性較大，可能需要稀釋80-100倍。

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

2. 國(guó)外試劑的訂購(gòu)?？商峁W美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購(gòu)方案。

3. 提供加急物流處理，進(jìn)口貨物，最快交期1-2周。

4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質(zhì)量保證，所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式，為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國(guó)際與國(guó)內(nèi)資源，加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè)，提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率，為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

7. 公司突出創(chuàng)新思維，提高工作效能，減低運(yùn)作成本，為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

半胱氨酰亞砜裂解酶（CSL)測(cè)試盒