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冷凍保護(hù)劑的儲(chǔ)存方案

更新時(shí)間:2023-12-27      點(diǎn)擊次數(shù):685

以下方案用于長期保存未染色的自由浮動(dòng)腦切片。將腦切片轉(zhuǎn)移至冷凍保護(hù)劑中并儲(chǔ)存在-20°C。根據(jù)染色目的,選擇合適的用于保存腦切片。

 

冷凍保護(hù)劑 1(用于光學(xué)顯微鏡)

 

制備 500 ml 冷凍保護(hù)劑

  • 蔗糖---------------------------------------- 150克

  • 0.1M PB ---------------------------- 200 毫升

  • 乙二醇-------------------- 150 毫升

  • 添加更多 0.1M PB 至最終體積 500 ml,并儲(chǔ)存于-20 °C。

冷凍保護(hù)劑 2(用于電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡)

 

制備 1000 ml 冷凍保護(hù)劑

  • 乙二醇 ------------------- 300 毫升

  • 甘油 -------------------------------------- 300 毫升

  • 0.2M PB -------------------------- 100 毫升

  • 蒸餾水 ------------------- 300 毫升

充分混合并儲(chǔ)存在-20°C。

 

冷凍保護(hù)劑 3(用于免疫熒光)

 

制備 1000 ml 冷凍保護(hù)劑

  • 蔗糖----------------------------------------- 300克

  • 聚乙烯吡咯烷酮 (PVP-40) --- 10 克

  • 0.1M PB ----------------------------------------- 500 毫升

  • 乙二醇--------------------- 300毫升

將 PVP-40 添加到 0.1M PB。攪拌溶解。緩慢加入蔗糖溶解,然后加入乙二醇并用0.1M PB定容至1000ml。儲(chǔ)存于-20°C。


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