快速色譜法是純化反應(yīng)混合物和天然產(chǎn)物提取物的重要工具。現(xiàn)代快速色譜儀器配備了紫外檢測器來觀察洗脫的化合物并觸發(fā)其收集。然而，用于分離各種混合物成分的溶劑有時會掩蓋或降低其可檢測性，從而降低其純度和回收率。

那么，你可以做些什么來緩解這個問題呢？

那么，您可以嘗試一些選擇，包括更換溶劑（例如，將乙酸乙酯改為丙酮或 MTBE）或使用能夠?qū)崟r消除溶劑紫外線吸收（又稱基線校正）的閃蒸系統(tǒng)。兩者都有各自的優(yōu)點，但本文重點討論基線校正。

Biotage® Selekt 等 Flash 系統(tǒng)提供實時基線校正。該功能消除了運行過程中溶劑造成的任何紫外線吸收，從而使紫外線吸收溶劑無法檢測到的化合物變得對檢測器可見。

例如，靛紅酸酐和芐胺的反應(yīng)產(chǎn)生了所需的產(chǎn)物和一些副產(chǎn)物。使用 5 克硅膠柱 (Biotage® Sf?r HC) 和庚烷/乙酸乙酯梯度進行快速色譜法僅檢測產(chǎn)品，因為基線隨著乙酸乙酯梯度的增加而上升，圖 1。

圖 1.使用庚烷/乙酸乙酯梯度純化反應(yīng)混合物，并使用 UV 檢測，無需基線校正，隱藏了粗反應(yīng)混合物中的副產(chǎn)物。

為了可視化反應(yīng)中產(chǎn)生的副產(chǎn)物，啟用系統(tǒng)基線校正功能（通常是默認(rèn)方法參數(shù)）的純化消除了這個問題，圖 2。

圖 2.啟用基線校正的反應(yīng)混合物純化揭示了隱藏的副產(chǎn)物。

因此，如果紫外線基線上升導(dǎo)致您出現(xiàn)檢測問題，請考慮具有基線校正功能的閃光系統(tǒng)。